A vékonyréteg-kromatográfia kémiai elemzési módszer, amely 0,1-0,5 mm vastagságú szorbensréteg stacionárius fázisként történő alkalmazásán alapul. A vékonyréteg-kromatográfiás módszer különféle területeken alkalmazható, és sokféle kémiai vegyület meghatározását teszi lehetővé.
Módszer elve
A vékonyréteg-kromatográfia módszere papírkromatográfiából született, és az első kísérleteket a 19. század 80-as éveiben hajtották végre. Ennek az elemzésnek az aktív felhasználása csak 1938 után kezdődött.
A TLC technika magában foglal egy mozgó fázist (eluens), egy álló fázist (szorbens) és egy analitot. Az álló fázist egy speciális lemezre rögzítjük és rögzítjük. A lemez üvegből, alumíniumból vagy műanyagból készülhet - ezek újrafelhasználható aljzatok, amelyeket minden használat után alaposan meg kell mosni, szárítani és előkészíteni a szorbens felvitelére. Lehetőség van olyan papírlemezek használatára is, amelyeket használat után ártalmatlanítanak.
A szilikagélt leggyakrabban állófázisként használják, de lehetséges más szorbensek, például alumínium-oxid, alkalmazása. Ennek vagy annak a szorbensnek a használatakor szigorúan be kell tartani a technológiát annak érdekében, hogy az eredmény pontos legyen, például azért, mert a szilikagél helytelen eredményt adhat, ha a laboratórium levegője túl nedves.
Oldószereket használunk mozgófázisként, például vizet, ecetsavat, etanolt, acetont, benzolt. Az oldószer megválasztását felelősen kell választani, mert a kromatográfia eredménye közvetlenül függ a minőségétől (viszkozitás, sűrűség, tisztaság). Minden elemzett mintához külön oldószert választunk.
Elemzés
A mintát oldószerben kell hígítani. Ha a teljes oldódás nem következik be, és túl sok szennyeződés marad, akkor a mintát extrakcióval meg lehet tisztítani.
A minta felvitele a lemezre történhet automatikusan vagy manuálisan. Az automatikus alkalmazás mikroszórásos módszert alkalmaz, ahol minden mintát a szubsztrátum megfelelő területére permeteznek. A kézi alkalmazáshoz mikropipettát használnak. Ceruza jeleket helyeznek a lemezre minden minta esetében. Mindegyik mintát kapillárissal viszik fel a lemezre egy vonalban, megfelelő távolságra a jelektől, hogy ne reagáljanak az ólomból származó szénnel.
A lemezt egy edénybe helyezzük, amelynek aljára az eluenst öntjük. A támaszt egy szélével az edénybe helyezzük a megjelölt vonalig. Az edény szorosan zárva van, hogy elkerüljük a mobil fázis párolgását. A kapilláris erők hatása alatt az eluens elkezd emelkedni a szorbens rétegben. Amikor az eluens elér egy bizonyos szintet, a lemezt kivesszük az edényből és megszárítjuk.
Ha a kívánt anyagnak nincs színe, akkor az nem lesz látható az aljzaton. Ezért vizualizációt hajtanak végre - a lemez feldolgozása jódgőzzel vagy más színezékekkel.
Ilyen feldolgozás után értékelik az eredményt. A szorbensen változó intenzitású színes területek jelennek meg. Az anyag (vagy anyagcsoport) meghatározásához a színezett területeket, méretüket, intenzitásukat és mobilitásukat összehasonlítják egy referencia mintával.
A TLC módszert széles körben használják, mert gyors, olcsó, pontos, intuitív, nem igényel összetett felszerelést és könnyen értelmezhető.
